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毕赤/酿酒酵母蛋白表达技术服务

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单价: 询价
所在地: 江苏 南京市
有效期至: 长期有效
最后更新: 2019-05-29 14:31
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公司基本资料信息

毕赤/酿酒酵母蛋白表达技术服务详细说明

钟鼎酵母细胞系统蛋白表达服务实验步骤及交付标准

毕赤酵母体系蛋白表达实验步骤及交付标准
1、表达体系系统选择(客户提供表达菌株的略过此步骤,仅提供表达质粒的可选择需要电转化的表达菌株)
1.1、可选表达载体
GAP启动子载体:pYE-GAPα,;
常规商业化载体:分泌表达:pPICZαA、pPIC9K,
胞内表达:pPICZA、 pPIC3.5K
1.2、可选表达菌株
GS115,X33菌株
SMD116蛋白酶缺失型菌株
2、毕赤酵母表达载体构建 交付材料及数据 实验周期 价格
A:基因优化
亚克隆设计
合成基因
B:亚克隆至载体
C: 质粒中抽及线性化-10ug
1、基因合成报告
2、测序验证报告
3、包含表达质粒的大肠杆菌DH5a
4、表达质粒
5、线性化检测图片
基因合成
2周左右
亚克隆
1-2周
线性化 2-3天
酵母蛋白表达服务属于科研型服务项目,为了给您提供更专业、细致的服务支持
请联系order@zoonbio.com
免费电话
400-066-8086

3、毕赤酵母蛋白表达鉴定 交付材料及数据 实验周期
D、电击转化
E、阳性克隆子筛选(PCR法)
F、高拷贝菌株筛选(可选)
G、表达小试(5-10菌株)
H、表达分析鉴定(Dot杂交)
I、定株,优化表达条件
6、阳性表达菌株
7、PCR鉴定阳性菌株图
8、高拷贝阳性菌株(可选)
9、小试表达流程报告
10、Dot Blot实验结果
11、小试表达总结
电转化及鉴定
1-2周
高拷贝筛选
2-3周(可选)

表达小试及鉴定
1-2周
4、毕赤酵母蛋白纯化及鉴定 交付材料及数据 实验周期
J、放大培养2-5升
K、表达上清液浓缩
L、Ni柱低压亲和纯化
M、PAGE分析纯化过程
N、WB鉴定纯化后蛋白
O、PFM检测(可选)
P、MS检测(可选)
12、蛋白纯化流程报告
13、蛋白纯化原始图片
14、发货蛋白
15、Western Blot(标签抗体)
16、蛋白指纹图谱(可选)
17、蛋白质谱分子量(可选)

放大培养
2-3周
蛋白纯化
1-2周
WB 1周
PMF 2-3周
MS 1-2周
说明:毕赤酵母细胞对密码子偏爱性要求较高,建议进行基因优化后再进行表达以提高成功率
1、正常情况下采用分步收费原则来收取费用,特殊订单承诺不成功不收费(详情请咨询公司技术支持 400-066-8086)
2、不同的蛋白表达量差异很大,我们会尽量提供mg级别以上的蛋白量给客户。
3、即使订单失败,我们也会提供全套的实验流程和原始照片,并将表达菌株及表达质粒返还给客户。
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