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流式细胞仪入门

   日期:2014-04-23     浏览:162    评论:0    
核心提示:本书介绍了流式细胞仪的基本知识,并从不同角度详尽阐述了各种台式机(FACScanTM,FACSortTM,FACSCaliburTM,和BD LSR)与大型机(FACS VantageTM,
本书介绍了流式细胞仪的基本知识,并从不同角度详尽阐述了各种台式机(FACScanTM,FACSortTM,FACSCaliburTM,和BD LSR)与大型机(FACS VantageTM,FACSVantageTM SE, 和FACStarPLUSTM)之间的不同。阅读本书有助于增强读者操作仪器的动手能力和经验。

流式细胞术是一项快速检测分析单个粒子多物理特性的高技术,通常指细胞通过激光束时在液流中的特性,即粒子的大小,密度或是内部结构,以及相对的荧光强度。通过光电系统记录细胞的散射光信号和荧光信号可得知细胞特性。
流式细胞仪主要由三部分组成:流动室和液流系统;光路系统以及电系统。其作用如下:
液流系统:依次传送待测样本中的细胞到激光照射区。
光路系统:细胞由激光激发,通过光学滤片产生光信号,并传送到相应的探测器。
电系统:把光信号转换为电信号。对于有分选装置的仪器,电系统可初始化分选条件。
在流式细胞仪中,细胞被传送到液流中的激光照射区。任何存在于悬液中的直径为0.2-150微米的粒子或细胞都适用于流式分析。在实际工作中,用实体组织进行流式细胞分析往往是不可能的,分析之前必须对其进行分解。被液滴包绕的粒子称为细胞液柱,当粒子经过激光照射区时,通过激光激发产生散射光。含有荧光的粒子就会表现出其荧光特性。散射光和荧光由光路系统(相应的透镜,滤片和探测器)收集。分光器和滤光片引导散射光和荧光至相应的探测器,把光信号转换为电信号。
单个粒子通过其表现出的光散射和荧光属性,通过列表模式(List mode)完成数据采集,并对样本中的细胞亚群进行分析。

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