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DyLight Fluor荧光染料介绍

   日期:2015-01-16     浏览:354    评论:0    
核心提示:DyLight Fluor是由Dyomics和赛默飞世尔科技合作开发的系列荧光染料,具有光谱宽度广、荧光强度高、光学稳定性好、对pH不敏感、分子较小渗透性好等优点,结合荧光显微镜等设备,可应用于生物医学研究中对组织、细胞和生物分子等的标记、定位 。DyLight系列染料通过化学合成方法在香豆素、氧杂蒽(如荧光素和罗丹明)、青色素等
DyLight Fluor是由Dyomics和赛默飞世尔科技合作开发的系列荧光染料,具有光谱宽度广、荧光强度高、光学稳定性好、对pH不敏感、分子较小渗透性好等优点,结合荧光显微镜等设备,可应用于生物医学研究中对组织、细胞和生物分子等的标记、定位。

DyLight系列染料通过化学合成方法在香豆素、氧杂蒽(如荧光素和罗丹明)、青色素等染料中引入磺酸酯基团。硫磺酯基团使得DyLight染料呈负电性和亲水性。多数商业化的DyLight染料通过琥珀酰亚胺酯与赖氨酸残基,通过顺丁烯二酰亚胺衍生物与半胱氨酸残基结合,从而标记底物蛋白。另外也有部分公司出售结合抗体的染料。

传统的荧光染料如荧光素、罗丹明、Cy3和Cy5等通过去除氧化物等工艺可使半衰期至少增加10倍,但是在暴露于荧光显微镜的激光束等强光源后仍容易发生荧光淬灭,从而限制了它们应用。DyLight系列荧光染料具有更好的光学稳定性、发光更持久。其荧光成像包括了最常用的荧光颜色,激发光和发射光光谱分布合理,覆盖大部分可见光和红外线区域,适用于绝大多数荧光显微镜,并可应用于红外成像系统[1][2]。其中DyLight 405在蓝色激发光下呈现紫色荧光,DyLight 488在青色 (488 nm)激发光下呈现绿色荧光,DyLight 550和594在绿色(526 nm)激发光下呈现橙黄色荧光,DyLight 633和650在红色(633 nm)激发光下呈现红色荧光。DyLight 680、755和800则适配基于激光或滤镜的红外成像系统,分别发射700 nm, 750 nm and 800 nm区域的光谱。

DyLight 550和DyLight 650染料具有高的荧光强度,不仅灵敏度高,而且特别耐受光淬灭。DyLight 550和DyLight 650染料的荧光特性分别与Alexa Fluor 555和Alexa Fluor 647相近,目前有胺反应性的NHS酯和巯基反应性的马来酰亚胺。

DyLight 550和650染料也可作为二抗和生物素结合蛋白的结合物。与现有的DyLight结合物相同,这些新染料可以非常高的染料-蛋白比例标记,同时不影响荧光信号或结合物稳定性。对于大部分应用而言,因DyLight 550和650染料灵敏度高,故实验所需量较低。因此,它们是性价比较高的选择。

DyLight 550和650抗体标记试剂盒可快速高效地标记抗体。两种不同规格的试剂盒形式可满足不同的标记要求。DyLight抗体标记试剂盒包含了所有必需的组分,能够利用1毫克IgG或相似量的其他蛋白开展3次标记反应。DyLight Microscale抗体标记试剂盒则能够对100 ug IgG开展5次标记反应。

到目前为止,DyLight 荧光基团大家族共有10位成员,最大吸收峰在350 nm至777 nm,覆盖了整个可见光谱和一些重要的近红外和远红外波长。DyLight 荧光基团的吸收和发射特性与实验室中常用仪器的激发和检测波长相匹配。

DyLight染料结合的二抗及其他分子探针除了用于免疫检测之外,可作为多个监测平台的基础,用于多重和高内涵的目标分析。例如,Thermo Scientific Near Infrared In-Cell ELISA Kits就使用了DyLight 680和DyLight 800结合的二抗,以ELISA形式定量整个细胞中特定目标的表达。生物通 www.ebiotrade.com

赛默飞世尔也提供了多个高内涵筛选试剂盒。这些试剂盒利用DyLight Fluor抗体及其他荧光探针,来检测特定蛋白的表达和转位以及细胞结构参数。与适当的成像仪器及分析软件结合,这些试剂盒为研究细胞反应提供了强大的工具。



  荧光颜色 摩尔质量(g/mol) 吸收光谱(nm) 发射光谱(nm) ε (M-1cm-1)
DyLight 350 紫色 874 353 432 15,000
DyLight 405 紫色 793 400 420 30,000
DyLight 488 绿色 1011 493 518 70,000
DyLight 550 黄色 982 562 576 150,000
DyLight 594 橙色 1078 593 618 80,000
DyLight 633 红色 1066 638 658 170,000
DyLight 650 红色 1008 654 673 250,000
DyLight 680 远红外 950 692 712 140,000
DyLight 755 近红外 1092 754 776 220,000
DyLight 800 近红外 1050 777 794 270,000

 

参考文献

  1. DyLight Reactive Dyes. Pierce Protein Research Products. 2008 [2008-12-09].
  2. DyLight Fluors - Technology and Product Guide. Pierce Protein Research Products. 2011 [2011-10-14].
  3. Fisher Biosciences Collaborates with Dyomics to Add Fluorescent Reagents for Protein Research. Press release (BNET). 2006-01-09 [2008-12-09]. (原始内容存档于2012-07-10).
 
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