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Hoechst 33342 *超级纯*

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品牌: Umibio
货号: A5430L2670
单价: 1875.00元/
有效期至: 长期供应
最后更新: 2017-12-19 21:12
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 Hoechst 33342 *超级纯*

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Hoechst 33342 *超级纯*

A5430L2670

5 mL(20mM)

-20℃

 

产品描述

Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低,在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 系列染料因与DNA结合的特性,也常被用来进行线粒体DNA的观察。Hoechst33258和Hoechst33342是两种非常相近的Hoechst染料,他们都在紫外段350nm被激发,发射波长都为461nm,两种染料经常被用来替代另一种荧光染料DAPI. Hoechst 33342比33258具有更强的亲脂性,因此能更好的透过完整的细胞膜,在部分实验中Hoechst33258的细胞透过性存在明显不足。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33342工作终浓度为0.5-5μM,在一些敏感性实验时,最好设置多个染色浓度,以获得最佳染色效果。

 

技术参数

光学性质:Ex(nm):350      Em(nm):461

化学参数:分子量:561.93      溶剂:Water        CAS:23491-52-3

 

使用方法

1.缓冲液制备。用PBS或合适的缓冲液制备10~50µM Hoechst 33342染色液。

2.固定的细胞或组织染色。对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。依次按步骤进行免疫荧光染色,和Hoechst33342染色。如果不进行免疫荧光染色,则直接按步骤进行Hoechst33342染色。

a)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。

b)吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。

c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长461nm。

3.活细胞或组织染色

a)细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。

b)在37℃培养细胞10~20分钟。

c)用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长461nm。

 

 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。-20℃干燥避光保存,保质期12个月。

 

注意事项

1. Hoechst 33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。

2. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。

3. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。

 

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