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磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒

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品牌: Umibio
货号: 0000
单价: 1.00元/盒
所在地: 上海
有效期至: 长期有效
最后更新: 2018-08-20 12:01
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公司基本资料信息
详细说明
  

磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒

【目录号】:D004(100 preps)

保存条件 

室温保存(15-30℃),有效期为12个月。

 

试剂盒组成

 

试剂名称

规格

1

裂解液

20ml

2

蛋白酶混合液

2ml

3

磁珠

1ml

4

洗液一

60ml

5

洗液二

60ml

6

洗脱液

6ml

 

 

 

 

 

 

 

 

【预期用途】

本试剂盒适用于人唾液、口腔黏液、口腔拭子等样品中快速提取、纯化基因组DNA的试剂盒,样品经简单预处理后直接提取,提取产物纯度高,片段完整,可用于后续各种分子生物学实验,如酶切、PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交等。

自备仪器和试剂

1) 恒温水浴锅,Votex

2) 80%乙醇异丙醇

操作步骤

1. 取待检唾液样本200μl,依次加入20μl蛋白酶混合液、200μl裂解液,漩涡振荡10s,56°C孵育10分钟。           

2. 然后加入300μl异丙醇和10μl磁珠,上下颠倒离心管10次,使管内磁珠分布均匀。

3. 静置离心管10分钟,每隔两分钟上下颠倒离心管5次,使管内磁珠分布均匀。

4. 将离心管置于离心机上,8000g离心1min,用移液器吸去管内液体。

5. 加入600μl洗液一,用移液器枪头轻柔打散管壁磁珠,漩涡振荡10s,直至其分布均匀。

6. 将离心管置于离心机上,8000g离心1min。用移液器吸去管内液体。

7. 加入600μl洗液二,用移液器枪头轻柔打散管壁磁珠,漩涡振荡10s,直至其分布均匀。

8. 将离心管置于离心机上,8000g离心1min。用移液器吸去管内液体。

9. 加入600μl的80%乙醇,用移液器枪头轻柔打散管壁磁珠,漩涡振荡10s,直至其分布均匀。

10. 将离心管至于离心机上,8000g离心1min。用移液器吸去管内液体。

11. 将离心管至于离心机上,8000g离心30s。用移液器吸去管内残余液体。

12. 打开管盖,室温干燥2分钟。

13. 加入60μl洗脱液,用移液器枪头打散管壁磁珠,直至其分布均匀。56°C孵育3分钟。

14. 将离心管至于离心机上,10000g离心1min。吸取上清至一个无核酶干净的离心管中,此即为纯化后的核酸溶液。

注意事项

1.所有吸弃上清的操作都不能将磁珠吸出。

2.每次洗涤都需要移液器枪头轻柔打散管壁磁珠,漩涡振荡10s,直至其分布均匀。

3.裂解液必须完全溶解为均一液体,如果出现浑浊或者沉淀,请将其置于37-56℃孵育直至澄清。

4.本试剂盒涉及的检测样本应视为具有传染性物质,操作和处理均需符合卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通用准则》和《医疗废物管理条例》相关要求。

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