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LB(Luria-Bertani)培养基的配制

   日期:2017-07-30     浏览:121    评论:0    
核心提示:LB培养基,是微生物学实验中最常用的培养基,用于培养大肠杆菌等细菌,其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。加入抗生素的 L
LB培养基,是微生物学实验中最常用的培养基,用于培养大肠杆菌等细菌,其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。加入抗生素的 LB 培养基可用于筛选以大肠杆菌为宿主的克隆。

尽管该培养基的名称被广泛解释为Luria-Bertani 培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语的 lysogeny broth,即溶菌肉汤。

LB培养基的成分(/L):

胰蛋白胨(tryptone):10g

酵母提取物(yeast extract):5g

氯化钠(NaCl):10g

固体培养基另加: 琼脂粉,15-20g

配制过程:
  (1)称量:分别称取所需量的胰蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于烧杯中。
  (2)溶化:加入所需水量2/3的双蒸水(去离子水)于烧杯中,用玻棒搅拌,使试剂全部溶化。
  (3)调pH:用5mol/L NaOH(约0.2ml)调pH至7.4。
  (4)定容:将溶液倒入量筒中,加双蒸水(去离子水)至所需体积。
  (5)加琼脂:加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。
  (6)分装、加塞、包扎。
  (7)高压蒸汽121℃灭菌20min。

如需:
氨苄青霉素浓度为Amp 50~100ug/ml,培养基高压灭菌后再加入。 氨苄青霉素储存液的浓度为4mg/ml 。
 
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