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  • 仙台病毒的制备程序
  • 一、灭菌处理1、实验前2-3 天将无菌室用福尔马林消毒,实验前一天用3%的来苏尔喷,灭菌,实验前半小时开紫外灯30 分钟,孵卵箱在使用前用70%酒精擦洗两次。2、将实验服、帽、口罩、纱布、脱脂棉0。85%生理盐水、无菌纸用高压法灭菌9。9104pa(15 磅,30 分钟)。将注射器(10ml、5ml、1ml 各2 支),镊子(大头各3 把)、打孔
  • 日期:2014-12-23  浏览次数:79  
  • 巢式PCR(Nested PCR)
  • 巢式PCR(Nested PCR)定义、原理和步骤
  • 日期:2014-12-18  浏览次数:89  标签:巢式PCR Nested PCR 引物 扩增
  • 甲醛变性电泳
  • 提取样品的总RNA后,一般根据RNA的凝胶电泳图来判断RNA的质量。由于RNA容易形成二级结构,因此常用甲醛变性胶来进行RNA电泳,得到的电泳图能真实反映RNA的质量状况。将RNA通过凝胶电泳使之在凝胶中分离出来,通过加入标准核酸分子(markers)对其进行鉴定,并用于转膜、杂交等。实验试剂1. DEPC 水的处理:用量筒量取去离子
  • 日期:2014-12-18  浏览次数:81  标签:甲醛变性电泳 FA缓冲液 MOPS电泳缓冲液 甲醛变性胶加样缓冲液 RNA电泳
  • Lambda DNA图谱
  • 以下内切酶在该载体上无酶切位点:AsiSI, FseI, I-CeuI, I-SceI, NotI, PI-PspI, PI-SceI, PacI, SfiI, SpeI, SrfI(x), SwaI(x) = NEB 不提供该内切酶Lambda ()是一种较大的 E. coli 温和噬菌体,具有较长的线状双链基因 DNA(1-5)。在 DNA 的两端,5 端比 3 端均多出 12 个碱基。当 DNA 进入宿主细胞后,通过单链粘性末
  • 日期:2014-12-10  浏览次数:93  
  • pBR322图谱
  • 以下内切酶在该载体上无酶切位点:AarI(x), Acc65I, AflII, AgeI, AleI, ApaI, ApuI, AscI, AsiSI, AvrII, BaeI, BbvCI, BclI, BglII, BlpI, BmgBI, BsaXI, BseRI, BsiWI, BsrGI, BssHII, BstBI, BstEII, BstXI, Bsu36I, CspCI, DraIII, Eco53KI, FseI, HpaI, I-CeuI, I-SceI, KpnI, MfeI, Ml
  • 日期:2014-12-10  浏览次数:163  标签:pBR322 内切酶
  • PCR 优化的一般指导原则
  • 概述NEB 针对基于 PCR 的应用提供多种 DNA 聚合酶。在产品的说明书或产品的网页介绍上可以找到针对不同产品的特定优化建议。下面的一般指导原则将帮助您的 PCR 实验顺利进行。反应建立指南DNA 模板 尽可能使用高质量、经过纯化的 DNA 模板。扩增未纯化的DNA 时(菌落 PCR 或直接 PCR),请参阅特定的产品信息 对于低复杂度的
  • 日期:2014-12-10  浏览次数:86  标签:退火 变性 引物 PCR 镁离子 dNTP OneTaq 热启动 超保真
  • 实验室常用培养基配方
  • ■Ampicillin (100mg/ml)□ 组份浓度 100mg/ml Ampicillin□ 配制量 50ml□ 配制方法1.称量5g Ampicillin置于50ml离心管中。2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50ml。3.用0.22um 滤器过滤灭菌。4.小份分装(1ml/份)后,-20℃保存。■IPTG (24mg/ml)□ 组份浓度 24mg/ml IPTG□ 配制量 50ml□ 配制方法1.称量1g X-Gal置
  • 日期:2014-12-09  浏览次数:137  
  • 实验室常用缓冲液配方
  • ■1M Tris-HCl (pH7.4, pH7.6, pH8.0)□ 组份浓度 1M Tris-HCl□ 配制量 1L□ 配制方法1.称量121.1gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.加入浓盐酸调节所需的pH值,加入约70ml的HCl使pH=7.4,加入约60ml的HCl使pH=7.6,加入约42ml的HCl使pH=8.0。4.将溶液定容至1L。5.高温高压灭菌后,室温保存。注
  • 日期:2014-12-09  浏览次数:108  
  • 应用A 蛋白亲和层析法纯化单克隆抗体
  • 摘 要:  应用Protein A 亲和层析法,从采集的小鼠腹水中纯化出了抗凝血因子Ⅶ单克隆抗体,用SDS2PAGE 和EL ISA 法分别检测了纯化后单克隆抗体的纯度及效价,结果显示,电泳为两条带,分别为免疫球蛋白G( IgG) 的重链和轻链,纯化后的单克隆抗体纯度达到电泳纯,应用间接EL ISA 法测定腹水效价为1 10 - 7 左右,与未纯化前无差异。
  • 日期:2014-11-26  浏览次数:139  
  • 抗体的亲和层析法纯化技术
  • 【实验原理】如图所示,亲和层析的高度选择性使得从某一初始材料中纯化,富集某一含量较低的目的蛋白成为可能,因此亲和层析是蛋白质分离纯化过程中最有效的方法之一。另外,如果配基与蛋白质的亲和能力很强,也可同时进行样品的浓缩。虽然多数情况下不需要将抗体与其他血清蛋白分开,但如果一旦需要,蛋白A亲和层析是一种非
  • 日期:2014-11-26  浏览次数:101  
  • 免疫共沉淀
  • 一 原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X
  • 日期:2014-11-25  浏览次数:89  
  • 大范围微管蛋白的制备 Large Scale Tubulin Preparation
  • Tubulin is purified from bovine/porcine brain by two cycles of polymerization/depolymerization followed by removal of copurifying proteins on a phosphocellulose (PC) column. The procedure described here is for a large scale prep (10 cow brains) that yield
  • 日期:2014-11-20  浏览次数:121  
  • 蛋白质组鉴定技术简述
  • 如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE,那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定。在这里,我们不考虑传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达。并不是因为这些方法无效,而是因为它们通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。目
  • 日期:2014-11-20  浏览次数:95  
  • 尿核基质蛋白22在膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用
  • 【摘要】 目的: 探讨尿核基质蛋白22(NMP22)检测对膀胱移行细胞癌诊断及术后复发监测中的应用价值. 方法:采用酶联免疫法(ELISA)检测45例膀胱癌、30例非膀胱癌泌尿系疾病、20例健康志愿者尿中NMP22水平并进行比较.
  • 日期:2014-11-13  浏览次数:200  
  • MUC1粘蛋白
  • 肿瘤生物学治疗的基础是肿瘤抗原的存在。随着生物化学、分子生物学、免疫学、遗传学等基础学科的飞速发展,对肿瘤的研究日益深入,特别是近十几年来,多种与肿瘤的发生发展密切相关的肿瘤抗原被发现,MUC1粘蛋白即是其中之一。   粘蛋白(mucins)是一类高分子量(>200 kD)糖蛋白,到目前共发现9种。其分子由肽核心和糖
  • 日期:2014-11-10  浏览次数:112  
  • 方法学评价常用指标
  • 首先制作相关四格表,再根据表格数据计算相应指标。
  • 日期:2014-11-10  浏览次数:138  
  • Molecular Weight Table
  • 蛋白名称来源M.W.AprotininBovine Pancreas6,500LactalbuminBovine Milk14,200LysozymeChicken Egg14,300MyoglobinEquine Heart17,000Trypsin InhibitorSoybeans20,100TrypsinogenBovine Pancreas24,000Triosephosphate IsomeraseRabbit Muscle26,600Carbonic AnhydraseBovine Eryt
  • 日期:2014-11-10  浏览次数:89  
  • 聚合材料的中英文对照及英文简称
  • Acrylonitrile/Methylacrylate copolymer丙烯腈/甲基丙烯酸酯共聚物 (Barex - 抗冲改性共聚物) Cellulose (Regenerated) (再生)纤维素 Cellulose Acetate 醋酸纤维素 (CA) Cellulose Acetate Butyrate 乙酸丁酸纤维素 (CAB) Cyclo-olefin copolymer 环烯共聚物 (Topas) Ethylene-Chlorotrifluoroethylene copolymer 乙烯-
  • 日期:2014-11-01  浏览次数:89  
  • 细胞培养常见问题解答
  • 1. 如何选用培养基?选择培养基没有一定标准,有几点建议可供参考:(1) 建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅文献,或在购买细胞株时咨询。(2) 本单位惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选1640;进行
  • 日期:2014-10-31  浏览次数:92  
  • 细胞培养基概论
  • 体外培养(in vitro culture)包括:组织培养(tissue culture)、细胞培养(cell culture)、器官培养(organ culture)。顾名思义,就是将活体结构成分(如活体组织、活体细胞或者活体器官等)从体内或其寄生体内取出,放在类似于体内生存环境的体外环境中,让其生长发育的方法。广义组织培养与体外培养同义。体外培养已经
  • 日期:2014-10-31  浏览次数:94  
  • 淋巴细胞亚群检测操作程序
  • 目的:保证流式细胞仪检测外周血中淋巴细胞亚群检验的工作质量,旨在保证淋巴细胞亚群检测的标准操作程序和控制检测结果的精确度与准确度。适用范围:外周血中淋巴细胞亚群检测。溯源:MultiTEST IMK Kit(美国BD Biosciences公司;CAT:340503)。实验原理:人的淋巴细胞根据其生物功能和细胞表面抗原的表达可分为三大类:T淋
  • 日期:2014-10-31  浏览次数:119  
CD3抗原不同克隆号的特点
  • CD3抗原不同克隆号的特点
  • 《CD3抗原》不同克隆号的特点OKT3、SK7/Leu4和UCHT-1单抗均识别转染有epsilon和delta链或epsilon和gamma链的细胞内CD3的epsilon链,但如果细胞仅转epsilon链,反而无法识别。这说明这三个克隆号的抗体是通过识别epsilon链的构象,即需要epsilon与delta或gamma链结合。因此,如果用这三个克隆的抗体检测epsilon阴性,并不代表
  • 日期:2014-10-30  浏览次数:138  
  • 巴比氏小鼠介绍 BALB/c小鼠
  • 这是一篇有关BALB/c小鼠的综述,是根据14篇发表使用实验的文章归纳的。这综述旨在帮助来邦网的访客找到最适合BALB/c小鼠。同义词: BALB/c mice, BALB/c, (B6 x BALB/c) F1, STAT6-deficient mice on BALB/c background, STAT4-deficient mice on BALB/c background, BALB/c (H-2d)Taconic为了用新的筛选方法研究治疗肝脏阶
  • 日期:2014-10-19  浏览次数:127  
  • 磁性氧化铁纳米颗粒的研究进展
  • 磁性氧化铁纳米颗粒的研究进展孙 涛,王光辉,陆安慧,李文翠大连理工大学精细化工国家重点实验室Research development of magnetic magnetite nanoparticlesSUN Tao,WANG Guanghui,LU Anhui,LI WencuiState Key Laboratory of Fine Chemicals,Dalian University of Technology摘要:磁性纳米颗粒是一种多功能性材料,在
  • 日期:2014-10-19  浏览次数:110  
测定单克隆抗体的效价的操作步骤:ELISA法
  • 测定单克隆抗体的效价的操作步骤:ELISA法
  • ①抗原包被:兔抗人IgG作为抗原,用包被液l:8000稀释,100L/孔加入聚苯乙烯96孔反应板中。4℃放置过夜。②洗涤:次日倾去凹孔内的液体,洗涤液洗3次。③封闭:加l00L/孔封闭液,室温放置0.5h.④洗涤:用洗涤液洗3次。⑤加待测样品(一抗):将含单克降抗体的细胞培养上清在另-块板上用PBS连续稀释(按照1:2或1:10),100
  • 日期:2014-10-18  浏览次数:109  
  • B细胞抗原受体(B cell recepter,BCR)
  • B细胞抗原受体是B细胞识别抗原的一种膜表面免疫球蛋白(SmIg)。B细胞的分化、成熟与活化的顺序是从骨髓干细胞、淋巴干细胞、前B细胞、末成熟B细胞,最后成熟为B细胞,当受抗原作用后,由活化的B细胞、记忆细胞和浆细胞在各个时期发生基因重排,则表达不同类别的SmIg。前B细胞分化早期,Ig胚系基因的链V区基因首先重排,表达的
  • 日期:2014-10-16  浏览次数:116  
  • 红细胞的C3b受体
  • 红细胞呈现免疫粘附现象发生免疫效应,是通过红细胞表面的C3b受体(C3bR,又称为complement receptor type 1, CR1)实现的。(一) C3b受体的一般性质 C3bR是一种存在于多种细胞膜上的多态性膜糖蛋白,其分子量为16~25kD,其活性可被胰酶、番木瓜酶、糜蛋白酶、鞣酸、甲醛及强酸强碱破坏,pH值6.7~7.3最适于红细胞免疫粘附(
  • 日期:2014-10-16  浏览次数:146  
  • 红细胞的免疫功能
  • 红细胞有多种免疫功能,是整体免疫系统不可缺少的组成成分,红细胞通过自身C3b的受体去识别、粘附、浓缩、杀伤抗原和清除有害物质,完成其免疫功能,具体表现在以下五方面:(一) 清除循环免疫复合物 由于循环系统中约95%的C3b受体位于红细胞上,所以循环免疫复合物(CIC)在血流中与红细胞结合的机会超过白细胞,约为白细胞的
  • 日期:2014-10-16  浏览次数:86  
  • 戊二醛二步法标记HRP抗体
  • 1. 原理戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。2. 试剂及器材(1)0.1M PH6.8磷酸缓冲盐水(PBS):取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M NaH2PO4 51ml,NaCl1.8克,加蒸馏水至200ml。(2)1.25%戊二醛液:取25%戊二醛50ml与PH6.8的PBS 1ml混合。(3)1M PH9.5碳酸
  • 日期:2014-10-16  浏览次数:70  
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